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IL-4 elisa檢測試劑盒的實驗操作流程和實驗原理 |
| 點擊次數(shù)：744 發(fā)布時間：2018/12/28 |
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上海撫生實業(yè)有限公司 |
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IL-4 elisa檢測試劑盒的 實驗操作流程：
1. IL-4檢測試劑盒（多種屬）從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。 IL-4 elisa檢測試劑盒的 實驗原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。 往預(yù)先包被(IL-4)elisa檢測,白介素4捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(IL-4)elisa檢測,白介素4呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。 |
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